GPC凝膠凈化系統(tǒng)是種快速、可靠的分子量分析和樣品凈化方法。它能夠通過(guò)凝膠過(guò)濾的方式分離和純化溶液中的大分子樣品,如蛋白質(zhì)、DNA、RNA等。采用一套特殊設(shè)計(jì)的柱組合,包括一個(gè)色譜柱和一個(gè)體積校準(zhǔn)柱。色譜柱通常由疏水性凝膠或孔隙型材料制成,用于分離不同分子量的樣品;體積校準(zhǔn)柱則用于校正樣品分子量的準(zhǔn)確性。
凝膠凈化過(guò)程中,溶液首先被加入柱中,然后通過(guò)一定的壓力驅(qū)動(dòng)進(jìn)入柱內(nèi)。在柱中,溶液中的大分子樣品會(huì)被凝膠所捕獲,而小分子則通過(guò)孔隙流出。這種分子量選擇性分離的原理是基于溶液中不同分子量樣品的擇篩作用,大分子會(huì)更容易與凝膠表面發(fā)生相互作用而保留在柱內(nèi),而小分子則更容易通過(guò)孔隙。
在樣品通過(guò)柱的過(guò)程中,可以采用檢測(cè)器監(jiān)測(cè)溶液中的信號(hào)變化,如吸光度或熒光強(qiáng)度變化等,來(lái)獲得溶液中不同分子量樣品的含量和分布情況。這些信號(hào)變化與溶液中分子量的變化有關(guān),通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較,可以計(jì)算出樣品在不同分子量范圍內(nèi)的含量。
在凝膠凈化過(guò)程中,為了保持分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,需要校正柱的體積以及檢測(cè)器的靈敏度。體積校準(zhǔn)柱通常由一種標(biāo)準(zhǔn)品組成,其分子量已知。在樣品通過(guò)柱之前或之后,體積校準(zhǔn)柱會(huì)被注入柱中,通過(guò)檢測(cè)器探測(cè)體積校準(zhǔn)柱的信號(hào)變化,可以確定柱和檢測(cè)器的體積校準(zhǔn)系數(shù),并校正分析結(jié)果。
GPC凝膠凈化系統(tǒng)的維護(hù)保養(yǎng)方法:
1.在每次使用完成后,用適當(dāng)?shù)那逑淳彌_液通過(guò)系統(tǒng)進(jìn)行清洗,以去除樣品殘留物和雜質(zhì)。
2.定期檢查凝膠凈化系統(tǒng)的各個(gè)部件,如泵浦、閥門、連接管路等是否正常工作,如有需要,及時(shí)更換或維修。
3.避免污染凝膠凈化系統(tǒng),定期清潔注射器、收集器等接觸樣品的部件。
4.當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間不使用凝膠凈化系統(tǒng)時(shí),將其儲(chǔ)存在干燥、清潔的環(huán)境中,避免灰塵、濕氣等對(duì)設(shè)備的損害。
5.如果發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)出現(xiàn)故障或異常,應(yīng)及時(shí)停止使用并聯(lián)系設(shè)備維修人員進(jìn)行檢修。
請(qǐng)注意,以上步驟和方法僅供參考,實(shí)際使用中應(yīng)根據(jù)具體設(shè)備的說(shuō)明書和操作手冊(cè)進(jìn)行操作。